جداسازی و تخلیص و تعیین ویژگی های بیوشیمیایی آنزیم لیپواکسیژناز از تخم کتان (flaxseed (linum usitatissimum
پایان نامه
- وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه فردوسی مشهد - دانشکده علوم پایه
- نویسنده سمیه طبخی
- استاد راهنما محمد رضا حسین دخت احمد آسوده
- سال انتشار 1393
چکیده
در این مطالعه، آنزیم لیپواکسیژناز (lox, ec 1.13.11.12)از تخم کتان flaxseed (linum usitatissimum) استخراج شد و در طی سه مرحله شامل: رسوب دهی با آمونیوم سولفات، کروماتوگرافی غربال مولکولی و کروماتوگرافی تبادل آنیونی با q-sepharoseبه میزان 81/262 برابر خالص گردید. وزن مولکولی آنزیم تخلیص شده با روش sds-page، 98 کیلو دالتون تخمین زده شد. بهترین فعالیت آنزیم در محدوده 8-7 ph = و حداکثر فعالیت آنزیم در 5/7 = ph به دست آمد. دمای بهینه آنزیم لیپواکسیژناز °c 45 است. فعالیت آنزیم پس از نگه داری با یون های فلزیfe+2،cu+2،ca+2، mg+2 و mn+2 در غلظت mm01/0، افزایش یافت. در حضور غلظت یک میلی مولار یون های na+ و co+2 فعالیت آنزیم کاهش یافت. غلظت¬های افزایشی triton x-100، sds، pmsf، ctab،edta و ?- مرکاپتواتانول باعث مهار فعالیت آنزیم lox شد. فعالیت آنزیم در حضور غلظت ((v/v10% حلال های آلی شامل ایزو- آمیل الکل و اتانول به ترتیب 109% و 5/112 % افزایش یافت. اثر چندین حلال آلی شامل: تولوئن، هگزان، متانول، دی اتیل اتر و کلروفرم، بر فعالیت آنزیم لیپواکسیژناز نشان داد که این حلال¬ها سبب کاهش فعالیت آنزیم می شوند. کمیت های kmو vmaxدر حضور سوبسترای لینولئیک اسید در phبهینه (5/7 = ph) به ترتیب µm16/2 و m min-1µ 014/0 به دست آمد .کمیت ic50 برای پتاسیم سیانید، آسکوربیک اسید و بتاکاروتن به ترتیب µm146،µm 80 و µm 2 تعیین شد. با توجه به نتایج بدست آمده از لیپواکسیژناز تخم کتان می توان از آن به صورت یک مدل برای مطالعه روابط ساختار- عمل و شناخت سازوکار آنزیمی استفاده کرد.
منابع مشابه
جداسازی، خالص¬سازی و تعیین ویژگی¬های بیوشیمیایی آنزیم لیپواکسیژناز از دانه کنجد (sesamum indicum) sesame
در این پژوهش، آنزیم لیپواکسیژناز (lox) از دانه کنجد sesame(sesamum indicum) با استفاده از روش¬های رسوب¬دهی با سولفات آمونیوم و روش¬های کروماتوگرافی ژل فیلتراسیون و تبادل یونی-q سفاروز خالص شد. در پایان مراحل خالص¬سازی، فعالیت ویژه آنزیم 4/159 و ضریب خالص¬سازی برابر 4/246 به دست آمد. وزن مولکولی این آنزیم براساس روش sds-page حدود 3/66 کیلودالتون محاسبه گردید. براساس نتایج گرفته شده، ph بهینه آنز...
Flax (Linum usitatissimum L
The archaeological evidence of flax cultivation dates back to >6000 BC and it is considered as one of the oldest and most useful crops. Components of flax have diverse uses. Cultivar development of flax is currently focused on enhancing the oil content and nutritional value to meet the demand of nutraceutical market supply, as an alternate source of fish oil, a rich source of eicosapentaenoic a...
متن کاملEffect of Raw and Heated Flaxseed (Linum Usitatissimum L.) On Blood Lipid Profiles in Rats
Flaxseed is a nutrient rich seed and lipid profiles improving effect of it has long been studied. Effect of heating as a part of food processing on its beneficial characteristics is not clarified in literature. This study aims to provide complementary information on effect of different dosages of raw and heated flaxseed on lipid profiles. Sprague Dawley rats were fed with 10%, 20% or 30% of eit...
متن کاملImpact of dietary flaxseed (linum usitatissimum) supplementation on biochemical profile in healthy rats.
Flaxseed has been suggested play preventive and therapeutic roles in cardiovascular disease. The aim of this study was to evaluate the influence of flaxseed-supplemented dietary in healthy rats. We used 30 rats divided in three groups (n = 10): Control Group (C) was fed with a casein-based chow (10% protein; 5% fiber; 7% lipid); Flaxseed Group (F) was fed with the casein-based chow supplemented...
متن کاملBiotechnology of Flax (Linum usitatissimum)
Biotechnology can offer useful tools to complement conventional breeding programs. The techniques of in vitro selection, that exploit phenomenon, called somaclonal variation, by screening cell cultures for resistance to herbicides, different types of stress or diseases, already helped to obtain tolerant lines of flax (Linum usitatissimum), which were used in further commercial breeding programs...
متن کاملAnti-inflammatory, analgesic and antipyretic activities of Linum usitatissimum L. (flaxseed/linseed) fixed oil.
The fixed oil of L. usitatissimum (flaxseed/linseed) inhibited PGE2-, leukotriene-, histamine- and bradykinin-induced inflammation. The oil also inhibited arachidonic acid-induced inflammation, suggesting its capacity to inhibit both cyclooxygenase and lipoxygenase pathways of arachidonate metabolism. In tail immersion model, the oil raised the pain threshold to a lesser extent than morphine bu...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده{@ msg_add @}
نوع سند: پایان نامه
وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه فردوسی مشهد - دانشکده علوم پایه
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023